以枸杞、南瓜为原料，利用植物乳杆菌（Lactobacillu plantarum）和鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）混菌（5∶1）发酵枸杞南瓜汁，以喷雾干燥法制备枸杞南瓜粉，采用单因素试验及正交试验优化喷雾干燥工艺，并通过体外模拟胃肠消化试验及自由基清除试验研究枸杞南瓜粉的消化特性及氧化活性。结果表明，最佳喷雾干燥工艺为进口热风温度160 ℃，进料流量7.5 mL/min，脱脂乳粉添加量2.5%。在此优化条件下，枸杞南瓜粉呈淡红色，集粉率40.3%、感官评分89.3分。体外消化特性及抗氧化活性试验结果表明，消化结束后测得发酵组消化液中总多酚、总黄酮含量分别上升了2.21%、6.35%，2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS+）自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟基自由基清除率分别为58.26%、86.43%、70.98%，显著高于对照组（P＜0.05），且肠消化阶段的抗氧化能力显著高于胃消化阶段（P＜0.05）。

旨在建立高效的南瓜淀粉组分检测技术，以期提高定向育种和合理开发南瓜新品种的效率。根据双波长比色原理，利用提纯的南瓜直链淀粉和支链淀粉，通过等吸收点作图法，确定南瓜淀粉组分测定波长和参比波长。通过单因素比较试验，确定双波长测定南瓜淀粉组分的200 μL反应体系。最后比较不同类型的南瓜淀粉组分含量，筛选极端材料。结果表明，直链淀粉的测定波长为616 nm、参比波长为472 nm，南瓜支链淀粉的测定波长为545 nm、参比波长为725 nm。建立南瓜直链淀粉和支链淀粉回归方程，直链淀粉浓度在0.0125~1 mg/mL、支链淀粉浓度在0.025~2 mg/mL范围内，线性关系良好(R²>0.9900)。96孔板200 μL反应体系为待测液20 μL、醋酸盐缓冲反应液(pH 3.5)90 μL、12倍碘液稀释液90 μL。供试23份南瓜材料的直链淀粉含量在0.52~26.68 mg/g果肉鲜重，支链淀粉含量在0.03~ 76.13 mg/g果肉鲜重，淀粉总量在0.55~101.61 mg/g果肉鲜重。以10和15 mg/g果肉鲜重、35和45 mg/g果肉鲜重、55和65 mg/g果肉鲜重，可以分别初步评价供试南瓜直链淀粉、支链淀粉和总淀粉含量低、中、高的情况。中印南瓜自交系比供试中国南瓜和印度南瓜的淀粉组分含量均高，最终筛选到7个中印南瓜自交系，用以淀粉定向育种潜力大。该试验获得的南瓜淀粉组分高效检测体系，对提高南瓜淀粉育种效率，行之有效。

为了建立南瓜类胡萝卜素高通量提取检测体系，以南瓜果肉为试材，通过单因素试验和L₂₇(3¹³)正交试验，确定和优化南瓜类胡萝卜素提取的最佳提取液、提取温度和料液比。结果表明，乙醇是提取南瓜类胡萝卜素的最佳提取液，在55℃条件下，以料液比1:28，浸提90 min，类胡萝卜素的得率显著高[(7.56±0.14) mg/100 g]。在南瓜类胡萝卜素的提取条件中，提取温度对提取效果影响最大，料液比×提取时间和提取时间×温度的互作次之。利用高通量提取检测体系比较分析23份不同类型南瓜材料类胡萝卜素含量，发现印度南瓜‘贝栗4号’和中国南瓜×印度南瓜远缘杂种自交系20F8的类胡萝卜素含量分别为(31.40±0.35) mg/100g和(24.72±0.72) mg/100 g，显著高于其他供试南瓜材料，具有显著的营养利用价值。试验获得的南瓜类葫芦卜素高效检测体系，省事省力，结果准确，可提高南瓜营养品质育种效率。

<p>Bioanalytical technology is being developed towards the direction of high throughput, high sensitivity and multi-functionality. Microplate readers serve as fundamental instruments for high-throughput analysis. They need to meet the requirements of microanalysis, automation and integration. At present, domestic instruments have limitations in terms of functionality and automation. Although the single-function microplate reader has basically reached the level of oversea equivalents, there is still a gap in the multifunctional instruments. Most of the multi-function microplate reader used are imported instruments. They are usually expensive and some operating instructions are not fully disclosed. It is difficult to integrate them into the automated foundry platform. In this study, we will research key technologies of high-precision absorbance detection and high-sensitivity fluorescence detection, and develop a multifunction microplate reader. The control and soft system is also developed independently to access the automated foundry platform. In our system, the absorbance optical system includes light source, filters, fibers and lens array. Multiple channels of transmitted light are detected in parallel to improve the speed of detection. Combined with the one-dimensional movement of microplate, the whole 96 wells are measured. The fluorescence optical system mainly includes LED light source, filter cube (emission filter, excitation filter and dichroic mirror) and photodiode detector. Single channel of excitation light is detected and two-dimension scanning mechanism is realized for the whole microplate measurement. Besides the optical system, high precision data acquisition system is developed, including signal amplifying, conditioning and isolating circuit. This microplate reader is compact with independent absorbance and fluorescence modules, and scalable wavebands. According to experimental results, the reproducibility of absorbance measurement is high with a standard error of 0.3% and the total 96 micro-wells can be detected accurately within 10 seconds. The fluorescence detection has good linearity in the picomole concentration and the limit of detection for sodium fluorescein is about 3.9 pmol/L. For synthetic biology automated foundry platform, this microplate reader can be directly connected to the integration control system through serial port, and can also be remotely controlled by TCP communication. </p><p><inline-formula><img src="https://iac.iacademic.info/nxtb/fileup/inline_graphic/2023/1700042167186_52556F35-7D36-4c42-BFB6-82FBD49486D5-F001.jpg"></img></inline-formula></p>

生物分析技术正向高通量、高灵敏度、多功能方向发展，微孔板检测仪作为高通量分析的基础仪器，需要满足微量化、自动化、集成化的要求。目前国内单一功能的微孔板检测仪器技术成熟，检测精度已与国际水平相当，但多功能的微孔板检测仪还较少，大多使用进口仪器。进口产品价格昂贵，有些操作指令不公开，不易集成到自主研发的合成生物自动化铸造平台项目。本研究将对高精度吸光度检测和高灵敏度荧光检测等关键技术进行研究，开发具有吸光检测和荧光检测功能的微孔板检测仪，并自主开发控制系统及数据采集分析软件，使其易于接入自动化铸造平台。该微孔板检测仪结构紧凑，吸光检测和荧光检测模块独立，波段可扩展。通过实验测试，所研发的微孔板检测仪的吸光度检测重复性为0.3%，10 s内可完成96孔的吸光检测；荧光检测数据在皮摩尔浓度范围内线性度较好，对荧光素钠溶液的检测灵敏度大约3.9 pmol/L。此外，该系统可通过串口直接连接自动化平台集成控制系统，也可通过TCP方式进行远程通信控制。

马铃薯块茎淀粉组分（直链/支链淀粉比AM/AP）影响淀粉特性以及决定其在食品和其他工业上的应用。AM/AP的测定对其合理利用以及选育特异淀粉组分的专用品种等具有重要意义。采用96孔板双波长法对马铃薯不同AM/AP比率标准样品进行测试,发现当测试样品AM/AP比率超过制作标准曲线的AM/AP比率（33.3%）时,测试结果明显高估直链淀粉含量。基于96孔板的碘染分析,建立了马铃薯AM/AP比率和最大吸收峰下波长的标准曲线:y = 601.88 x^0.0215,R² = 0.9999。该方法进一步提高了测试准确度和应用范围。利用该方法测试了198个马铃薯品种（系）以及高直链淀粉组分的转基因块茎,明确了收集的马铃薯品种（系）的直链淀粉组成范围为17.4% ~ 33.3%。新建立的马铃薯淀粉组分测试方法为高效准确筛选遗传育种材料以及改良淀粉组分株系提供了方便。

在对127份南瓜材料进行感官鉴定的基础上，选取10份口感明显不同的南瓜材料为研究对象，分别测定其质构指标及生化指标，并分析感官属性和质构指标以及感官属性和生化指标的相关性。结果表明：南瓜的感官属性可以分为3个主成分，第1主成分为粉质、干湿情况和甜度，第2主成分为面度和纤维度，第3主成分为硬度和脆性；南瓜的质构指标也分为3个主成分，第1主成分为硬度、回复性和剪切力，第2主成分为内聚性，第3主成分为黏附性和弹性。感官属性与质构指标及理化指标不同项目之间具有不同的相关性。南瓜感官评价的关键指标为粉质，干湿情况和甜度。

为了在表型和分子层面分析中国南瓜×印度南瓜种间杂种拓宽南瓜遗传背景的可能性,利用30个表型性状和20对SSR分子标记,同时对当前市售食用南瓜品种、宁波市农业科学研究院多年积累的骨干亲本、以及中印南瓜种间杂种自交系及其新配组合共53份南瓜材料进行遗传多样性分析。结果表明,骨干亲本和中印南瓜种间杂种后代在株型、生长势、果实皮色、果型等方面增加了南瓜品种多态性的丰富度。20个SSR标记在53份南瓜材料的多态性比例为90%。在主成分分析的基础上,表型聚类和分子聚类的结果吻合度提高。2种方法3次聚类的结果都将供试印度南瓜商品种及骨干亲本聚为一类,表明其相似度较高,同质化严重,不利于培育突破性品种。其次,聚类结果都将中印南瓜远缘杂交后代及组合单独聚为一类,与印度南瓜商品种、印度南瓜骨干亲本,以及中国南瓜材料显著分开。表明中印南瓜远缘杂交后代无论在分子层面还是表型层面都与供试南瓜品种和育种材料有显著差异,增加了南瓜的遗传多样性。通过种间杂种,可以为食用南瓜新品种选育提供异质基因。主成分分析获得的6个主成分因子,可简化食用南瓜性状调查指标。